PCR扩增和菌体内扩增DNA有何区别?

2025-04-05 21:49:00
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回答1:

当然有别的目的。

举个最常见的例子,对未知序列进行测序。

你确实可以通过PCR把整段基因都扩增出来,但是因为现在测序的技术限制,DNA片段两端的序列是测不出来的,直接PCR产物测序的结果只能获得基因中间部分序列。所以我需要利用细菌的T载体进行TA克隆,把基因整合到质粒上扩增,然后用质粒上的引物再PCR,让我们的整个目的基因成为新一轮PCR产物的中间部分,这样再测序就能够获得整个目的的全长序列。

另外,PCR扩增平均每1000个碱基就有两个错误,保真性远不及菌体内复制。