在亲和纯化中，his标签常常会遇到这种问题， 没有收集到蛋白可能是蛋白溜走了，没有收集到，可能使样品的缓冲液不正确，尤其针对pH值，或者是his标签没有暴露出来，因此没有挂住，或者可以用WB检测一下HIS是否还在，更多his亲和纯化的相关问题，可见文章，总结的比较实际有用，希望对你有所帮助，http://wenku.baidu.com/view/521ff9cec281e53a5902ff27
