A、染色质高度螺旋化成染色体，此时有染色单体存在，A正确；B、着丝点分裂，细胞中没有染色单体，B错误；C、核膜核仁消失是细胞分裂前期，有染色单体，C正确；D、着丝点排在赤道板上，是细胞分裂中期，有染色单体，D正确．故选：B．
