基因分离定律的内容是在杂合体进行自交形成配子时,等位基因随着一对同源染色体的分离而彼此分开,分别进入不同的配子中,即分离定律的实质是等位基因彼此分离.两只杂合黑豚鼠交配,其后代为黑豚鼠的几率是 3 4 ,为白豚鼠的几率是 1 4 .因此杂合黑豚鼠一胎生出4只豚鼠,则出现3黑1白的可能性为 3 4 × 3 4 × 3 4 × 1 4 = 27 256 .故选:D.