菲林试剂:由0.1g/ml的NaOH溶液、0.05g/ml的CuSO4溶液混合而成,碱性条件下加热时与醛基反应生成Cu2O沉淀。该试剂分为A、B液,先混合再使用,需要现用现配。(用于鉴别还原糖:葡萄糖、果糖和麦芽糖,热水水浴加热有砖红色沉淀。)
双缩脲试剂:由0.1g/ml的NaOH溶液及0.01g/ml的CuSO4溶液组成,反应的成分是碱性环境中的Cu2+,与酰胺键结合成紫色洛合物。该试剂分为A、B液,先加NaOH,再加CuSO4,需要现用现配。(用于鉴定蛋白质,呈紫色。)
(1)溶液浓度不同
cuso4溶液称为斐林试剂乙,其浓度为0.05
g/ml;
cuso4溶液(双缩脲试剂b)的浓度为0.01
g/ml。
(2)使用原理不同
斐林试剂是新配制的溶液,它在加热条件下与醛基反应,被还原成砖红色的沉淀,可用于鉴定可溶性还原糖的存在。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,溶液的颜色变化过程为:深蓝色→黄色(cuoh沉淀)→砖红色(沉淀)。
鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂,发生的是双缩脲反应。具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。蛋白质的肽键在碱性溶液中能与cu2+络合成紫红色的化合物。颜色深浅与蛋白质浓度成正比。