如何克隆一个真核细胞的基因(分子生物学)?跪求。。。在线等。。。十万火急。。。要求答案详细全面,参

2025-04-17 18:40:00
推荐回答(4个)
回答1:

克隆一个基因有很多种方法,你知不知道你要克隆的基因是什么基因吗?有没有已知的序列?如果啥都没有的话,建议你在GENBANK上先查查有没有那个基因的序列,或者是同源的其他生物中有没有类似基因序列找出其保守域。再一点是你们有没有那生物的cDNA文库呀?基因组文库呢?你所说的条件太少了,要回答的话很麻烦,建议你先看看有没有其他的关于这个基因的信息。我可以给你个思路,先按上面说的找到已知序列或同源序列,然后PCR扩增,然后筛库,再走RACE。当然说的忒简单了,搞基因这东西得看你现在所掌握的信息以及自己实验室所具备的条件了。

回答2:

需要先把染色体提出来,还要去除染色体中的蛋白,有专用的试剂盒可以完成上面两部 如qiagen
PCR可以从转录起始点进行复制,可问题是染色体中有很多起始点,而且基因都是以片段形式存在,杂乱无章
所以新手最好克隆原核的基因,如果一定要克隆真核的,可以参见《分子克隆实验指南》
网上都有下载的

回答3:

首先,楼主,我湖南的,高三,我的答案仅共参考。

从基因的表达来说,DNA复制需要相应的四种碱基ATGC,
在我们这里选修三中讲到,有一种技术叫PCR技术,就是把目的基因大批量复制的技术
在Taq酶(耐高温酶)的作用下,在高温条件下,可以打断DNA分子双链的氢键,
那么,你就可以利用碱基互补配对原则,拿着一条单链,一个一个的链接了啊、

回答4:

如果你知道其序列就比较好办,只用设计引物在PCR仪上扩增就好。PCR体系可根据不同需求设置,由ddH2O、dNTP、10*Buffer、引物、Taq酶构成。程序根据引物及产物情况设置。