斐林试剂的工作原理是醛基与氢氧化铜发生氧化还原反应生成氧化亚铜，所以斐林试剂氢氧化钠是生成氢氧化铜的反应物之一，也提供了碱性条件。双缩脲试剂的工作原理是铜离子在强碱性条件下与肽键发生反应生成紫色络合物。（我们做实验的时候，斐林试剂是先在一个试管里制，然后加到还原糖溶液里，双缩脲试剂是先往蛋白质里加碱，再加铜离子。之所以这样就是这个原因。这也是为什么双缩脲试剂的硫酸铜浓度比氢氧化钠稀了很多而斐林试剂二者浓度相近的原因）
