1、颠倒是为了混合均匀；2、保温30分钟是为了统一反应时间，便于比较，而且30分钟的曲线最直，变化呈线性；3、空白管是为了扣除试剂本身的吸光度。空白管是试剂加蒸馏水，测出来也就是试剂空白。因为 操作环境、仪器状态、试剂稳定性等变异，所以要求每次都要测定试剂空白，称为实时试剂空白。
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