您问的这个问题我也曾疑惑过，我跟您交流一下我的想法。封闭前要不要洗板？我觉得是要的。因为包被液同封闭液的成分不同，pH也可能不一样，有必要将孔板洗净。加一抗前要不要洗板？我觉得要看情况。一般的ELISA实验中封闭液同时也是一抗稀释液，这时就没必要洗板了。但是如果一抗稀释液同封闭液成分不同，则应该洗板，去除封闭液的游离成分。
