将两种物质配成相同的浓度，点相同的量的点后，同时展开，再点另一块板，更换另一种层析液来展开，在两块板上，均能在相同的位置出现相同大小和颜色的斑点，基本可以认为是同一物质。
在层析板上用毛细管取两种物质点到起始点上，用一种溶剂进行层析，测算Rf值；更换溶剂，再进行一次层析，测算Rf值；两个物质如果在两种不同的溶剂进行层析时，Rf值都相同，基本可以确定是同一种物质
