免疫组化BCA法是什么意思?

最好是能具体点,本人加高分跪求?
2025-04-08 18:08:30
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回答1:

  Bicinchoninic acid (BCA )法是近来广为应用的蛋白定量方法。其原理与Lowery法蛋白定量相似,即在碱性环境下蛋白质与Cu2+络合并将Cu2+还原成Cu1+。BCA与Cu1+结合形成稳定的紫蓝色复合物,在562 nM处有高的光吸收值并与蛋白质浓度成正比,据此可测定蛋白质浓度。与Lowery法相比,BCA蛋白测定方法灵敏度高,操作简单,试剂及其形成的颜色复合物稳定性俱佳,并且受干扰物质影响小。与Bradford法相比,BCA法的显著优点是不受去垢剂的影响。
  器材
  1. 7220型分光光度计
  2. 比色杯
  3. 恒温水浴箱
  4. 中试管7支
  5. 枪式移液管
  试剂
  1. 试剂A: 1%BCA二钠盐
  2%无水碳酸钠
  0.16%酒石酸钠
  0.4%氢氧化钠
  0.95%碳酸氢钠
  混合调PH值至11.25。
  2. 试剂B:4%硫酸铜。
  3. CA工作液:试剂A?100ml?+?试剂B?2ml混合。
  4. 蛋白质标准液:用结晶牛血清白蛋白根据其纯度用生理盐水配制成1.5mg/ml的蛋白质标准液。(纯度可经凯氏定氮法测定蛋白质含量而确定)
  5. 待测样品:用双缩脲测定法的样品稀释而成。
  具体可参照
  http://www.51protocol.com/pro/base1/20071106/39210.html