简述革兰氏染色的操作步骤

革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：

1）涂片固定。

2）草酸铵结晶紫染1分钟。

3）蒸馏水冲洗。

4）加碘液覆盖涂面染约1分钟。

5）水洗，用吸水纸吸去水分。

6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸去水分。

7）蕃红染色液（稀）染1分钟后，蒸馏水冲洗。干燥，镜检。

扩展资料

革兰氏染色法的意义就在于鉴别细菌，把众多的细菌分为两大类，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。

在治疗上，大多数革兰氏阳性菌都对青霉素敏感（结核杆菌对青霉素不敏感）：大多数化脓性球菌都属于革兰氏阳性菌，它们能产生外毒素使人致病，可以选择青霉素族，头孢曲松钠等。

革兰氏阴性菌，大多数肠道菌多属于革兰氏阴性菌，它们产生内毒素，靠内毒素使人致病。而革兰氏阴性菌则对青霉素不敏感，可以选择氟喹诺酮类药物如诺氟沙星，左氧氟沙星等，也可以选择大环内酯类比如克拉霉素、罗红霉素等。所以首先区分病原菌是革兰氏阳性菌还是阴性菌，在选择抗生素方面意义重大。

参考资料来源：百度百科-革兰氏染色

参考资料来源：百度百科-革兰氏染色法

革兰氏染色法具体操作步骤：

1. 涂片固定。

2. 草酸铵结晶紫染1分钟。

3. 纯化水冲洗。  

4. 加碘液覆盖涂面染1分钟。

5. 水洗，用吸水纸吸去水分。  

6. 加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，30秒后水洗，吸去水分。  

7. 番红染色液（稀）染10秒钟后，纯化水冲洗。干燥，镜检。

• 基本原理：革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。它是1884年由丹麦医师Gram创立的。革兰氏染色法（Gram stain）不仅能观察到细菌的形态而且还可将所有细菌区分为两大类：染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌，用G+表示；染色反应呈红色（复染颜色）的称为革兰氏阴性细菌，用G-表示。细菌对于革兰氏染色的不同反应，是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。

  
  

• 器材：大肠杆菌，金黄色葡萄球菌；草酸铵结晶紫，番红水溶液，碘液，95%乙醇，载玻片，显微镜等。

步骤
　　革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是：　　
1）涂片固定.　　
2）草酸铵结晶紫染1分钟.　　
3）自来水冲洗.　　
4）加碘液覆盖涂面染约1分钟.　　
5）水洗,用吸水纸吸去水分.　　
6）加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分.　　
7）蕃红染色液（稀）染2分钟后,自来水冲洗.干燥,镜检.
染色结果
　　革兰氏阳性菌都呈紫色,革兰氏阴性菌都呈红色.

（视频）革兰氏染色法