转化之后复苏感受态细胞能用加了氨苄的LB培养基吗

2025-04-05 14:32:39
推荐回答(3个)
回答1:

是不应该加的。
热激就是让菌体瞬间热胀,表面蛋白掉下来形成通道,质粒才能进去,这个过程对细菌是有伤害的。菌体42度热激之后很脆弱。另外热激时会死一部分细菌,死掉的细菌会裂解,释放出一些蛋白酶什么的,对活着的细菌也不太好。用不加抗生素的LB37度温浴是为了让还活着的细菌更好的复苏。如果加了抗生素会增加细菌复苏时的负担。但是温浴的时间也不宜过长,一般以半个小时到一个小时之间为宜。

回答2:

Trans 1-T1 Phage Resistant 感受态细胞是目前生长速度最快的感受态细胞,在氨苄青霉素平板上,8-9 h 可见克隆;用于蓝、白斑筛选,12 h 可见蓝斑;将过夜培养的单克隆在2 ml 的LB 培养基中培养4-5 h 即可进行小量质粒提取;适用于高效的DNA 克隆和质粒扩增,减少克隆DNA 同源重组的发生,提高质粒DNA 的产量和质量;具有T1,T5 噬菌体抗性。使用pUC19 质粒检测,转化效率可达109cfu/μg。

回答3:

不能,如果复苏时间短,会导致比未复苏的浓度还低,以至于培养基上无法长出菌落