细胞融合的具体步骤包括:
(1)细胞准备,分贴壁和悬浮细胞两种。前者可直接将两亲本细胞混合培养,后者需制成一定浓度的细胞悬浮液。
(2)细胞融合,加促融因子于将行融合的细胞之中,诱导融合。
(3)杂种细胞选择。利用选择性培养基等,使亲本细胞死亡,而让杂种细胞存活。
(4)杂种细胞克隆。对选出的杂种细胞进行克隆(选择与纯化),经过培养,就能获得所需要的无性繁殖系。
动物:物理法、化学法(同植物)以及生物法(灭活病毒等);
植物:物理法(离心、振动、电刺激等)和化学法(聚乙二醇(PEG))。