不知你扩的是什么，退火温度是根据正反引物设计的。这种情况一般是需要降温的，但降温的同时会有非特异性扩增的。如果你的非特异性扩增很少，只是目的条带很弱的话，可以增加模板量，酶量，或者适当增加延伸时间试试。仅供参考吧。
